విషయము
- ప్రధాన తేడా
- సదరన్ బ్లాటింగ్ వర్సెస్ వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్
- పోలిక చార్ట్
- సదరన్ బ్లాటింగ్ అంటే ఏమిటి?
- వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ అంటే ఏమిటి?
- కీ తేడాలు
- ముగింపు
ప్రధాన తేడా
సదరన్ బ్లాటింగ్ మరియు వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ మధ్య ఉన్న ప్రధాన వ్యత్యాసం ఏమిటంటే, సదరన్ బ్లాటింగ్ అనేది ఒక నిర్దిష్ట నమూనాలో ఒక నిర్దిష్ట డిఎన్ఎ భాగాన్ని గుర్తించడానికి ఉపయోగించే ఒక టెక్నిక్, అయితే ఇచ్చిన నమూనాలో ఒక నిర్దిష్ట ప్రోటీన్ను కనుగొనడానికి వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ ఉపయోగించబడుతుంది.
సదరన్ బ్లాటింగ్ వర్సెస్ వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్
బ్లాటింగ్ అనేది శాస్త్రవేత్తలు మిశ్రమం లేదా నమూనా నుండి వివిధ రకాల అణువులను వేరు చేయడానికి ఉపయోగించే ఒక సాంకేతికత. ఈ పద్ధతిలో, న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలు (DNA మరియు RNA) మరియు మిశ్రమంలోని ప్రోటీన్లు వంటి స్థూల కణాలు జెల్ స్లాబ్ ద్వారా కదులుతాయి. ఇక్కడ, నిమిషం కణాలు పెద్ద వాటి కంటే వేగంగా కదులుతాయి. ఈ అణువులు స్థిరమైన పొర యొక్క ఉపరితలంపై ఒత్తిడి చేయబడతాయి, ఇది అణువులను పొరపైకి బదిలీ చేస్తుంది. నిర్దిష్ట పదార్థాన్ని గుర్తించడం ఆధారంగా వివిధ రకాల బ్లాటింగ్లు ఉన్నాయి, అనగా, దక్షిణ బ్లాటింగ్, నార్తర్న్ బ్లాటింగ్ మరియు వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్. సదరన్ బ్లాటింగ్ అనేది DNA ను గుర్తించడానికి ఉపయోగించే బ్లాటింగ్ రకం, అయితే వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ ప్రోటీన్ను కనుగొనడానికి ఉపయోగిస్తారు. సదరన్ బ్లాటింగ్ను 1975 లో ఎడ్వర్డ్ ఎం. సదరన్ అభివృద్ధి చేశారు. కాబట్టి, దీనిని సదరన్ బ్లాటింగ్ అంటారు. మరోవైపు, వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ను 1979 లో స్టాన్ఫోర్డ్ విశ్వవిద్యాలయంలో జార్జ్ స్టార్క్ బృందం అభివృద్ధి చేసింది. ఈ పేరు దక్షిణ బ్లాటింగ్తో సరిపోలడానికి ఉపయోగించబడింది. ఒక నిర్దిష్ట DNA క్రమాన్ని తెలుసుకోవడానికి సదరన్ బ్లాటింగ్ ఉపయోగించబడుతుంది, అయితే, ఒక నిర్దిష్ట అమైనో ఆమ్లం లేదా ప్రోటీన్ క్రమాన్ని తెలుసుకోవడానికి వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ ఉపయోగించబడుతుంది.
పోలిక చార్ట్
సదరన్ బ్లాటింగ్ | వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ |
ఇచ్చిన మిశ్రమంలో ఒక నిర్దిష్ట DNA క్రమాన్ని తెలుసుకోవడానికి ఉపయోగించే సాంకేతికతను దక్షిణ బ్లాటింగ్ అంటారు. | ఇచ్చిన మిశ్రమంలో ప్రోటీన్ యొక్క నిర్దిష్ట అమైనో ఆమ్లాల క్రమాన్ని తెలుసుకోవడానికి ఉపయోగించే సాంకేతికతను దక్షిణ బ్లాటింగ్ అంటారు. |
ద్వారా అభివృద్ధి చేయబడింది | |
1975 లో ఎడ్వర్డ్ ఎం. సదరన్ చేత సదరన్ బ్లాటింగ్ అభివృద్ధి చేయబడింది. | వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ను 1979 లో స్టాన్ఫోర్డ్ విశ్వవిద్యాలయంలో జార్జ్ స్టార్క్ బృందం అభివృద్ధి చేసింది. |
డిటెక్షన్ రకం | |
ఒక నిర్దిష్ట DNA క్రమాన్ని తెలుసుకోవడానికి సదరన్ బ్లాటింగ్ ఉపయోగించబడుతుంది. | ఒక నిర్దిష్ట అమైనో ఆమ్లం లేదా ప్రోటీన్ క్రమాన్ని తెలుసుకోవడానికి వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ ఉపయోగించబడుతుంది. |
ప్రిన్సిపల్ | |
ఇది హైబ్రిడైజేషన్ సూత్రంపై పనిచేస్తుంది. | ఇది ఇమ్యునోడెటెక్షన్ పద్ధతి లేదా యాంటిజెన్-యాంటీబాడీ ఇంటరాక్షన్ సూత్రంపై పనిచేస్తుంది. |
పరిశోధన | |
సింగిల్-స్ట్రాండ్డ్ DNA లేదా కొన్నిసార్లు RNA ను ప్రోబ్గా ఉపయోగిస్తారు. | ప్రాథమిక మరియు ద్వితీయ ప్రతిరోధకాలను ప్రోబ్గా ఉపయోగిస్తారు. |
జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ | |
అగరోస్ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ సదరన్ బ్లాటింగ్లో ఉపయోగించబడుతుంది. | SDS PAGE / పాలియాక్రిలమైడ్ జెల్ వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్లో ప్రోటీన్లను వేరు చేయడానికి ఉపయోగిస్తారు |
బ్లాటింగ్ విధానం | |
సదరన్ బ్లాటింగ్ కేశనాళిక బదిలీ విధానాన్ని అనుసరిస్తుంది. | వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ విద్యుత్ బదిలీ విధానాన్ని అనుసరిస్తుంది. |
నమూనా | |
సదరన్ బ్లాటింగ్ సమయంలో, నమూనాను డీనాచురేట్ చేయాలి. | వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ సమయంలో, నమూనా దాని స్వంత రాష్ట్రంలో ఉండాలి. |
బ్లాకింగ్ | |
దక్షిణ బ్లాటింగ్లో నిరోధించడం వంటి ఏ దశ కూడా లేదు. | వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ సమయంలో, పాల పౌడర్ లేదా బోవిన్ సీరం అల్బుమిన్ (బిఎస్ఎ) సహాయంతో నైట్రోసెల్యులోజ్ కాగితంపై నాన్స్పెసిఫిక్ యాంటీబాడీ సైట్లు నిరోధించబడతాయి. |
లేబులింగ్ పద్ధతులు | |
దక్షిణ బ్లాటింగ్లో ఉపయోగించే సాధారణ లేబులింగ్ పద్ధతులు క్రోమోజెనిక్ రంగులు లేదా రేడియోలాబెల్లింగ్ లేదా ఫ్లోరోసెంట్ లేబులింగ్ మొదలైనవి. | వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్లో ఉపయోగించే లేబులింగ్ పద్ధతులు ఫ్లోరోసెంట్గా లేబుల్ చేయబడిన యాంటీబాడీ లేదా రేడియోలాబెల్లింగ్, క్రోమోజెనిక్ రంగులు లేదా డైమినోబెంజిడిన్ ఏర్పడటం మొదలైనవి. |
గుర్తింపు పద్ధతులు | |
కాంతిని గుర్తించడం, ఆటోరాడియోగ్రాఫ్ మరియు రంగులో మార్పులు దక్షిణ బ్లాటింగ్లో గుర్తించే పద్ధతులుగా ఉపయోగించబడతాయి. | వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్లో డిటెక్షన్ పద్ధతులు రంగులో మార్పులు మరియు కాంతిని గుర్తించడం మొదలైనవి. |
అప్లికేషన్ | |
డిఎన్ఎ డిటెక్షన్, పితృత్వ పరీక్ష, డిఎన్ఎ ఫింగరింగ్, బాధితుల గుర్తింపు కోసం, నేరస్థులను గుర్తించడం, అంటు ఏజెంట్లను కనుగొనడం మరియు మ్యుటేషన్ లేదా జన్యు పునర్వ్యవస్థీకరణ మొదలైన వాటిలో సదరన్ బ్లాటింగ్ ఉపయోగించబడుతుంది. | పాశ్చాత్య బ్లాటింగ్ ఒక మిశ్రమంలో ప్రోటీన్ల సంఖ్యను కనుగొనడానికి, సీరంలో హెచ్ఐవి, వైరస్ మరియు బ్యాక్టీరియా మొదలైనవాటిని గుర్తించడానికి, లోపభూయిష్ట ప్రోటీన్లను తెలుసుకోవడానికి మరియు హెర్పెస్, హెపటైటిస్ బి, లైమ్ వ్యాధి, మరియు క్రీట్జ్ఫెల్డ్ట్-జాకబ్ వ్యాధి మొదలైనవి. |
సదరన్ బ్లాటింగ్ అంటే ఏమిటి?
సదరన్ బ్లాటింగ్ అనేది ఎడ్విన్ సదరన్ ఇచ్చిన పురాతన బ్లాటింగ్ పద్ధతి, దీనికి దక్షిణ బ్లాటింగ్ అని పేరు పెట్టారు. ఇచ్చిన నమూనా లేదా మిశ్రమంలో DNA యొక్క నిర్దిష్ట క్రమాన్ని తెలుసుకోవడానికి ఇది ఉపయోగించబడుతుంది. ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్, బదిలీ మరియు నిర్దిష్ట సన్నివేశాలను గుర్తించడం దక్షిణ బ్లాటింగ్ సమయంలో దశలు. అన్నింటిలో మొదటిది, నిర్దిష్ట పరిమితి ఎంజైమ్ సహాయంతో DNA విచ్ఛిన్నమవుతుంది. అప్పుడు కావలసిన DNA శకలాలు జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ద్వారా వేరు చేయబడతాయి. ఈ శకలాలు రెండు DNA తంతువులను వేరు చేయడానికి ఆల్కలీన్ ద్రావణం, ఉదా., NaOH మొదలైన వాటి సహాయంతో డీనాట్ చేయబడతాయి. ఈ సింగిల్-స్ట్రాండ్డ్ DNA శకలాలు బ్లాటింగ్ ప్రక్రియ ద్వారా పొరపై బదిలీ చేయబడతాయి. ఈ పొర-సరిహద్దు DNA తరువాత లేబుల్ చేయబడిన ప్రోబ్తో చికిత్స పొందుతుంది. ఈ ప్రోబ్ మెమ్బ్రేన్ డిఎన్ఎపై దాని పరిపూరకరమైన స్ట్రాండ్తో జతచేయబడుతుంది, ఇది ఆటోరాడియోగ్రామ్ మొదలైన వాటి ద్వారా చూడవచ్చు.
వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ అంటే ఏమిటి?
వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ పద్ధతిని స్టాన్ఫోర్డ్ విశ్వవిద్యాలయంలోని జార్జ్ స్టార్క్ బృందం కనుగొన్నారు, ఇది ప్రోటీన్లోని అమైనో ఆమ్లాల యొక్క నిర్దిష్ట క్రమాన్ని గుర్తించడానికి ఉపయోగించబడుతుంది. దీనిని ప్రోటీన్ బ్లాట్ లేదా ఇమ్యూన్ బ్లాటింగ్ అని కూడా అంటారు. పాశ్చాత్య బ్లాటింగ్ సమయంలో దశలు ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్, బదిలీ మరియు నిర్దిష్ట ప్రోటీన్ల గుర్తింపు. అన్నింటిలో మొదటిది, మిశ్రమాన్ని సజాతీయపరచండి. అప్పుడు ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ సహాయంతో ఆసక్తి యొక్క అణువును వేరు చేయండి. పొరపై ఈ అణువులను బదిలీ చేయండి మరియు నిర్దిష్ట ప్రోబ్ ఉపయోగించి నిర్దిష్ట ప్రోటీన్ను గుర్తించండి.
కీ తేడాలు
- ఇచ్చిన మిశ్రమంలో ఒక నిర్దిష్ట DNA క్రమాన్ని తెలుసుకోవడానికి ఉపయోగించే సాంకేతికతను దక్షిణ బ్లాటింగ్ అంటారు, అయితే, ఇచ్చిన మిశ్రమంలో ప్రోటీన్ యొక్క నిర్దిష్ట అమైనో ఆమ్లాల క్రమాన్ని తెలుసుకోవడానికి ఉపయోగించే సాంకేతికతను దక్షిణ బ్లాటింగ్ అంటారు.
- దక్షిణ బ్లాటింగ్ను 1975 లో ఎడ్వర్డ్ ఎం. సదరన్ అభివృద్ధి చేశారు, దీనిని దక్షిణ బ్లాటింగ్ అని పిలుస్తారు. మరోవైపు, 1979 లో స్టాన్ఫోర్డ్ విశ్వవిద్యాలయంలో జార్జ్ స్టార్క్ బృందం వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ అభివృద్ధి చేసింది.
- ఒక నిర్దిష్ట DNA క్రమాన్ని తెలుసుకోవడానికి సదరన్ బ్లాటింగ్ ఉపయోగించబడుతుంది. దీనికి విరుద్ధంగా, ఒక నిర్దిష్ట అమైనో ఆమ్లం లేదా ప్రోటీన్ క్రమాన్ని తెలుసుకోవడానికి వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ ఉపయోగించబడుతుంది.
- ఫ్లిప్ వైపు హైబ్రిడైజేషన్ సూత్రంపై సదరన్ బ్లాటింగ్ పనిచేస్తుంది; వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ ఇమ్యునోడెటెక్షన్ పద్ధతి లేదా యాంటిజెన్-యాంటీబాడీ ఇంటరాక్షన్ సూత్రంపై పనిచేస్తుంది.
- సింగిల్-స్ట్రాండ్డ్ డిఎన్ఎ లేదా కొన్నిసార్లు ఆర్ఎన్ఎను మరొక వైపు సదరన్ బ్లాటింగ్లో ప్రోబ్గా ఉపయోగిస్తారు, వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్లో ప్రాధమిక మరియు ద్వితీయ ప్రతిరోధకాలు ప్రోబ్గా ఉపయోగించబడతాయి.
- అగరోస్ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ దక్షిణ బ్లాటింగ్లో ఉపయోగించబడుతుంది, అయితే SDS PAGE / పాలియాక్రిలమైడ్ జెల్ వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్లో ప్రోటీన్లను వేరు చేయడానికి ఉపయోగిస్తారు.
- దక్షిణ బ్లాటింగ్ మరోవైపు, కేశనాళిక బదిలీ విధానాన్ని అనుసరిస్తుంది; వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ విద్యుత్ బదిలీ విధానాన్ని అనుసరిస్తుంది.
- సదరన్ బ్లాటింగ్ సమయంలో, నమూనాను డీనాట్రేట్ చేయవలసి ఉంటుంది, అయితే, వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ సమయంలో, నమూనా దాని స్థానిక రాష్ట్రంలో ఉండాలి.
- ఫ్లిప్ వైపు దక్షిణ బ్లాటింగ్లో నిరోధించడం వంటి ఏ దశ కూడా లేదు, వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ సమయంలో, పాల పౌడర్ లేదా బోవిన్ సీరం అల్బుమిన్ (బిఎస్ఎ) సహాయంతో నైట్రోసెల్యులోజ్ కాగితంపై నిర్ధిష్ట యాంటీబాడీ సైట్లు నిరోధించబడతాయి.
- దక్షిణ బ్లాటింగ్లో ఉపయోగించే సాధారణ లేబులింగ్ పద్ధతులు క్రోమోజెనిక్ రంగులు లేదా రేడియోలాబెల్లింగ్ లేదా ఫ్లోరోసెంట్ లేబులింగ్ మొదలైనవి. అయితే, వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్లో ఉపయోగించే లేబులింగ్ పద్ధతులు ఫ్లోరోసెంట్గా లేబుల్ చేయబడిన యాంటీబాడీ లేదా రేడియోలాబెల్లింగ్, క్రోమోజెనిక్ రంగులు లేదా డైమినోబెంజిడిన్ ఏర్పడటం మొదలైనవి.
- కాంతిని గుర్తించడం, ఆటోరాడియోగ్రాఫ్ మరియు రంగులో మార్పులు దక్షిణ బ్లాటింగ్లో గుర్తించే పద్ధతులుగా ఉపయోగించబడతాయి, అయితే, వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్లో గుర్తించే పద్ధతులు రంగులో మార్పులు మరియు కాంతిని గుర్తించడం మొదలైనవి.
- సదరన్ బ్లాటింగ్ను డిఎన్ఎ డిటెక్షన్, పితృత్వ పరీక్ష, డిఎన్ఎ ఫింగరింగ్, బాధితుల గుర్తింపు కోసం, నేరస్థులను గుర్తించడం, అంటు ఏజెంట్లను కనుగొనడం మరియు మ్యుటేషన్ లేదా జన్యు పునర్వ్యవస్థీకరణను గుర్తించడం మొదలైన వాటిలో ఉపయోగిస్తారు. దీనికి విరుద్ధంగా, పాశ్చాత్య బ్లాటింగ్ ఒక ప్రోటీన్ సంఖ్యను కనుగొనడానికి ఉపయోగిస్తారు మిశ్రమం, సీరంలో హెచ్ఐవి, వైరస్ మరియు బ్యాక్టీరియా మొదలైనవాటిని గుర్తించడం, లోపభూయిష్ట ప్రోటీన్లను కనుగొనడం మరియు హెర్పెస్, హెపటైటిస్ బి, లైమ్ డిసీజ్ మరియు క్రీట్జ్ఫెల్డ్ట్-జాకబ్ వ్యాధి మొదలైన వాటికి ఖచ్చితమైన కొలతగా ఉపయోగిస్తారు.
ముగింపు
పైన చర్చలో దక్షిణ బ్లాటింగ్ అనేది ఒక నమూనాలో నిర్దిష్ట DNA విభాగాన్ని కనుగొనటానికి ఉపయోగించే పురాతన బ్లాటింగ్ టెక్నిక్, అయితే వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ తరువాత కనుగొనబడింది మరియు అమైనో ఆమ్లాల యొక్క నిర్దిష్ట క్రమాన్ని లేదా ఒక నిర్దిష్ట ప్రోటీన్ను గుర్తించడానికి ఉపయోగించబడింది.